核酸染料選擇指南，請(qǐng)點(diǎn)擊http://m.dg688.com.cn/news_detail.aspx?NewsID=24

RealSafe Red核酸染色劑

●  產(chǎn)品規(guī)格：

● 簡(jiǎn)介：

RealSafe Red?是一種可以替代溴化乙錠（EB）的紅色熒光核酸染色劑，與GelRed是類似產(chǎn)品。與SYBR或EB相比，RealSafe Red最顯著的特性是其在多種條件下的高靈敏性和穩(wěn)定性。另外相對(duì)EB或SYBR，RealSafe Red誘導(dǎo)突變的能力極低。

特點(diǎn)：1. 靈敏度高，小分子片段更清晰。

      2. 對(duì)核酸上樣量有更好的兼容性，不會(huì)出現(xiàn)濃度高片段彎曲現(xiàn)象。

      3. 染料在膠中遷移度低，電泳后紫外觀察不會(huì)出現(xiàn)陰陽(yáng)膠現(xiàn)象。

4. 花菁素染料，安全無(wú)毒。

5. 使用范圍廣泛：可以染色RNA，雙鏈DNA和單鏈DNA；可以染色瓊脂糖凝膠和PAGE凝膠。

●  貯存：

4-8℃避光保存2年。

●  RealSafe Red的使用方法：

注意：染料使用前應(yīng)在常溫下徹底融化混勻后使用。

1.  RealSafe Red預(yù)染方法（推薦方法）：

1.1 將RealSafe Red試劑按1:10000溶于瓊脂糖凝膠溶液中，充分混勻。（例如：將5 μl RealSafe Red 試劑加入到50 ml 凝膠溶液中）。注：由于RealSafe Red 具有出色的熱穩(wěn)定性，可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中，而不用等凝膠溶液冷卻后再加入。

1.2 澆制凝膠并使其凝固后上樣電泳。

注意：使用這種預(yù)先加入染色劑的瓊脂糖凝膠，每次不易加入太多的 DNA 樣品，否則容易造成飽和現(xiàn)象，可以做多個(gè)不同濃度的 DNA Marker，以確定最佳 DNA 上樣量。

1.3 紫外下觀察結(jié)果。

注：如果始終出現(xiàn)拖尾或是條帶無(wú)法分離的現(xiàn)象，您可以使用后染法對(duì)DNA染色，以確認(rèn)問題是否與染色劑有關(guān)。如果使用后染法問題依舊存在，則說明問題與染色劑無(wú)關(guān)，請(qǐng)嘗試減少核酸的上樣量后進(jìn)行電泳。

2.  RealSafe Red后染方法：

2.1 用制備凝膠電泳對(duì)應(yīng)的1×電泳緩沖液將RealSafe Red稀釋約5000倍，制成即用型染色溶液。(例如：將20 μl RealSafe Red加入到100 ml 緩沖液中)。

2.2 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的即用型染色溶液浸沒凝膠。

2.3 在常溫下輕輕地?fù)u動(dòng)凝膠板，最佳的染膠時(shí)間為30 分鐘，這取決于凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長(zhǎng)短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高，染色所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)。注：染色溶液至少可重復(fù)使用2-3次。如果不是立即再用的話，建議將用過的染色溶液冷藏避光保存。

2.4 紫外下觀察結(jié)果。

● 實(shí)驗(yàn)示例：

DNA Marker III  1% agarose gel 150V 1×TAE 35min  RealSafe Red預(yù)染